Infectividad intracelular del micobacteriófago TM4 en células humanas como modelo de tuberculosis

Natalia Sommario - Martin Edreira - Mariana Piuri

Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica. Buenos Aires, Argentina. - CONICET - Universidad de Buenos Aires. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales (IQUIBICEN). Buenos Aires, Argentina.

La tuberculosis (TB) es una de las enfermedades infecciosas más letales del mundo, responsable de cerca de 1,3 millones de muertes por año. Esto, sumado a la alta incidencia de TB resistente a antibióticos, la convierte en una enfermedad candidata para evaluar tratamientos basados en bacteriófagos, virus capaces de infectar bacterias. Sin embargo, Mycobacterium tuberculosis es un patógeno intracelular, por lo tanto, los bacteriófagos deben ser capaces de encontrar e infectar a las bacterias dentro de las células humanas. Con el objetivo de evaluar la capacidad de los bacteriófagos de actuar en un contexto intracelular, nuestra investigación se centra en la interacción entre el micobacteriófago TM4 y células A549, provenientes del epitelio pulmonar humano. En primer lugar, en ausencia de M. tuberculosis, se observó que los fagos pueden adsorberse a las células A549. Luego, utilizando fagos marcados en forma fluorescente, también se observó por microscopía confocal que pueden ser internalizados por las mismas células. Esto se ve acompañado de un aumento en la actividad endolisosomal. Finalmente, para evaluar la capacidad infectiva del fago internalizado, se utilizó un micobacteriófago reportero. Este lleva en su genoma el gen mCherrybomb, que al inyectarse durante el ciclo infectivo del fago, es expresado por la bacteria y permite la acumulación de la proteína fluorescente. Las células A549 fueron infectadas en primer lugar con M. tuberculosis y luego fueron incubadas con el fago reportero. Se confirmó la expresión de mCherry en bacterias intracelulares por microscopía, indicando que los fagos retienen su capacidad infectiva dentro de las células hospedadoras. Los micobacteriófagos podrían ser candidatos prometedores para el tratamiento de la tuberculosis, aunque aún se requiere más trabajo para identificar los mecanismos mediante los cuales los fagos ingresan a las células humanas e infectan a las bacterias en su interior.