Interacción funcional GR-PR y su impacto en la morfogénesis de esferoides mamarios. Modulación transcripcional del gen FKBP5

Maximiliano Gutiérrez ¹ - Norma Roxana Carina Alves ² - Marcelo Gabriel Stinson ³ - Abel Carcagno ³ - Adali Pecci ^1,4 - María Florencia Ogara ⁴

1 Departamento de Química Biológica, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad de Buenos Aires.
2 Unidad de Microanalisis y Metodos fisicos en Quimica Organica  (UMYMFOR). Universidad de Buenos Aires- CONICET.
3 Instituto de Química Biológica de Ciencias Exactas y Naturales (IQUIBICEN). Universidad de Buenos Aires-CONICET.
4 Instituto de Fisiología Biología Molecular y Neurociencias (IFIBYNE). Universidad de Buenos Aires- CONICET.

Los receptores nucleares (NR) son factores de transcripción activados por ligando. En la glándula mamaria modulan proliferación, diferenciación y apoptosis. Modulan progresión de cáncer de mama siendo considerados blancos moleculares para la investigación traslacional. Comparten características estructurales y funcionales. Aquí se presentan resultados obtenidos del estudio de interacción funcional entre los receptores de glucocorticoides (GR) y de progestágenos (PR), los cuales a pesar de sus similitudes estructurales y en sus mecanismos de acción, provocan efectos biológicos que difieren y a veces son opuestos. Observamos que en la línea celular tumoral mamaria humana MCF-7 L, la activación de GR afecta significativamente la proliferación celular dependiente de PR (% de células en fase S= 13,7 ± 0,7 % vs. 10,2 ± 0,3 % del Control) e inhibe el aumento del volumen y área en un 15% de esferoides formados con dichas células, incubados durante 96 h en medio con 5% y 10% de suero delipidado. A su vez, la expresión de ciertos genes blanco de la acción de PR, también se afecta por la activación simultánea de GR. A fin de profundizar en el mecanismo de interacción funcional, evaluamos la expresión de FKBP5, gen que posee un sitio específico de unión a sendos receptores. Se subclonó ese sitio en un vector reportero que expresa luciferasa (pFkbp5-HRE-Luc) y dicho vector fue co-transfectado con vectores de expresión de PR y de GR en células HEK293T estimuladas con las respectivas hormonas. Los resultados mostraron una posible interferencia de PR en la actividad de GR. El mecanismo de interacción sería por co-reclutamiento de ambos receptores a dicho sitio (evaluado por ChIP secuencial sobre el gen endógeno) y por la evidencia que indica que ambos receptores formarían parte del mismo complejo cuando ambos se co-expresan y activan simultáneamente en células vivas.