Explorando la relación entre condensados de SOX2 y marcas epigenéticas en células madre embrionarias

Lucila Boto ^1,2 - Camila Oses ^1,2 - Maria Candelaria Diaz ^1,2 - Sabrina Roberti - Melanie Aranovich ² - Santiago Cavedo ² - Alejandra Guberman ^2,3 - Valeria Levi ^1,4

1 Laboratorio de Dinámica Intracelular. Departamento de Química Biológica, FCEN-UBA; IQUIBICEN, UBA/CONICET.
2 Laboratorio de Regulación Génica en Células Madre, Departamento de Química Biológica, FCEN, UBA; IQUIBICEN, UBA/CONICET.
3 Departamento de Fisiología, Biología Molecular y Celular, FCEN, UBA.
4 Departamento de Química Biológica, FCEN, UBA.

El factor de transcripción de pluripotencia SOX2, esencial para el mantenimiento de la pluripotencia, forma condensados nucleares cuya organización espacial se modifica durante la salida del estado pluripotente. Este cambio en su distribución podría estar modulado por el entorno epigenético, ya que SOX2 actúa como un factor “súper-pionero”; inhibe la metilación del DNA en sus sitios blanco e interactúa con UHRF1, una proteína clave en el mantenimiento de la metilación del DNA. En este proyecto, buscamos explorar la relación entre la organización subnuclear de SOX2 y ciertas marcas epigenéticas relevantes en células madre embrionarias de ratón (mESC), tanto en estado de pluripotencia naïve como durante la salida del mismo. Como primer paso, analizamos la distribución nuclear de SOX2-mCherry y su colocalización con la la marca H3K27me3 mediante microscopía confocal, tras tratar las células con GSK-J4, una droga que inhibe las desmetilasas JMJD3/UTX, impidiendo la remoción de H3K27me3 y favoreciendo su acumulación. Nuestros resultados preliminares indican que, tras el tratamiento, los condensados de SOX2 tienden a ser más pequeños, mientras que H3K27me3 presenta una distribución más heterogénea con condensados más intensos. Estas observaciones sugieren una reconfiguración de la organización nuclear en respuesta a la modulación epigenética. Estos resultados preliminares sugieren que el contexto epigenético afecta los condensados de SOX2 . A futuro, analizaremos su distribución y dinámica en diferentes fases del ciclo celular y evaluaremos interacciones funcionales con reguladores como UHRF1 y DNMT1 mediante microscopía confocal en células vivas.