Extracellular vesicles from trophoblast cells overexpressing VIPR2 induce angiogenesis

Franco Aguilera ¹ - Vanesa Hauk ¹ - Daniel Grasso ² - M Noé García - Brenda Lara¹ - Fátima Merech ¹ - Nancy Charó ³ - Valentina Petrelli ⁴ - Horacio Aiello ⁴ - Cesar Meller⁴ - Rosanna Ramhorst ¹ - Esteban Grasso ¹ - Claudia Pérez Leirós ¹ - Daiana M Vota ¹ - Daniel E Paparini ¹

1 Universidad de Buenos Aires (UBA), Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnicas (CONICET), Instituto de Química Biologica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales (IQUIBICEN-CONICET), Laboratorio de Inmunofarmacologia, Buenos Aires, Argentina
2 Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral (IDEHU), CONICET-Universidad de Buenos Aires, Junín 956, Piso 4, Buenos Aires CP 1113, Argentina.
3 Instituto de medicina experimental (IMEX)-CONICET/Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires, Buenos Aires, Argentina.
4 Hospital Italiano de Buenos Aires, Servicio de Obstetricia, Buenos Aires, Argentina

La remodelación vascular es un paso crítico para una correcta placentación. Durante este proceso, la expresión del receptor VIPR2, por la proteina VIPR2 aumenta en las vellosidades placentarias humanas y se ha asociado con efectos angiogénicos en modelos murinos. A la vez, durante el embarazo se incrementa la cantidad de vesículas extracelulares (EVs), y aquellas derivadas de células trofoblásticas (Tb-EVs) desempeñan un papel clave en la regulación de la placentación. Sin embargo, aún no se conoce si la expresión de VIPR2 en las células trofoblásticas contribuye directamente a los efectos proangiogénicos de las EVs. En este estudio analizamos el impacto de EVs provenientes de una línea trofoblástica humana que sobreexpresa VIPR2 (Tb-VIPR2) sobre funciones endoteliales.
Las EVs se obtuvieron de la línea Swan 71 transfectada con un plásmido VIPR2 o un vector vacío (control, Tb-C) mediante centrifugación diferencial. La caracterización incluyó microscopía electrónica de transmisión, análisis de seguimiento de nanopartículas (NTA) y citometría de imágenes. Las células endoteliales EA.hy926 y HUVEC se emplearon para ensayos de cicatrización por cierre de la herida, detección de especies reactivas de oxígeno (ROS) y formación de túbulos.
Las Tb-VIPR2 EVs presentaron VIPR2 en su membrana junto con las tetraspaninas CD9 y CD81. Funcionalmente, aumentaron la migración endotelial (*P < 0.05), mostraron tendencia a disminuir ROS y favorecieron un mayor número de mallas, nodos y segmentos en los ensayos de tubulogénesis (*P < 0.05).
Estos resultados respaldan un rol modulador de las EVs derivadas de células trofoblásticas que expresan VIPR2 sobre la función endotelial y sugieren que VIPR2 podría participar en las adaptaciones vasculares de la placenta humana.