ANDROGEN RECEPTOR INHIBITION UNLOCKS PKA/OSTEOPONTIN ACTIVATION AND PROSTATE CANCER THERAPY RESISTANCE.

Julia Lechuga ^1,2 - Agustina Sabater ^1,2,3 - Rocío Seniuk ^1,2 - Elba Vazquez ^1,2 - Estefania Labanca ⁴ - Nicolas Anselmino ⁵ - Geraldine Gueron ^1,2 - Pablo Sanchis ^1,2,3,4

1 Laboratorio de Inflamación y Cáncer, Departamento de Química Biológica, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad de Buenos Aires, Buenos Aires C1428EGA, Argentina.
2 CONICET-Universidad de Buenos Aires, Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales (IQUIBICEN), Buenos Aires C1428EGA, Argentina.
3 Universidad Argentina de la Empresa (UADE), Instituto de Tecnología (INTEC), Buenos Aires C1073AAO, Argentina.
4 Department of Genitourinary Medical Oncology and The David H. Koch Center for Applied Research of Genitourinary Cancers, The University of Texas MD Anderson Cancer Center, Houston, TX 77030, USA.
5 Prostate Cancer Research Group, Vall d’Hebron Institute of Oncology (VHIO), Vall d’Hebron University Hospital, Barcelona, Spain

SPP1 (osteopontina), una proteína caracterizada por su papel en la fisiología ósea, se encuentra estrechamente asociada al cáncer de próstata (PCa). En trabajos previos demostramos que el colágeno I y la fibronectina derivados del hueso activan la vía de PKA, la cual regula la expresión de SPP1 en PCa. En este estudio, buscamos esclarecer el rol del receptor de andrógenos (AR) en el eje PKA/SPP1. Utilizando datos transcriptómicos de pacientes con PCa metastásico (dataset SU2C-PCF), observamos que aquellos con un puntaje alto de AR presentaban menor expresión de SPP1 y menor actividad de PKA (P<0.05), lo que sugiere un papel regulador negativo de AR. In vitro, las células C42B (AR-positivas) no mostraron expresión de SPP1 por RT-qPCR. Este crosstalk negativo se confirmó al transfectar células PC3 (AR-negativas) con pcDNA3-AR. En este modelo, la dihidrotestosterona (DHT; inductor de AR, 10 nM) revirtió la activación del eje PKA/SPP1 inducida por forskolina (FK; inductor de PKA, 10 μM por 24 h). In vivo, inyectamos células C42B en los fémures de ratones machos CB17 SCID, sometidos a cirugía simulada o castración quirúrgica. Consistentemente, observamos un aumento tanto en la tinción de SPP1 como en la actividad de PKA en los xenotrasplantes óseos de ratones castrados mediante IHC. Funcionalmente, la activación de PKA con FK confirió resistencia al efecto citotóxico de enzalutamida (inhibidor de AR) en células C42B (P<0.05). Además, el tratamiento con H89 (inhibidor de PKA, 10 μM, 7 días) redujo significativamente la formación de colonias en células PC3 (P<0.05). En conjunto, demostramos que el AR ejerce una regulación negativa sobre el eje PKA/SPP1, el cual es requerido para la supervivencia celular y el crecimiento clonogénico, indicando que este crosstalk podría contribuir al desarrollo de resistencia terapéutica.