Role of heterogeneous ribosomes on translational activity from quiescence exit cells

Fernández Martín - Ortolá María Clara - Rossi Silvia - Galello Fiorella - Portela Paula.

Universidad de Buenos Aires

La quiescencia es el estado predominante de las células. S. cerevisiae es un buen modelo para estudiar su base molecular. Antes observamos que la composición ribosomal de monososomas y polisomas cambia durante la activación traduccional de células quiescentes. Ahora analizamos el rol de proteínas ribosomales (RP) evaluando crecimiento y traducción en mutantes que carecen de un gen RPG.
Todas las cepas RPG∆ alcanzan niveles similares de crecimiento en fase estacionaria y viabilidad, pero rpp2B∆ y rps7B∆ muestran retraso, mientras que rpl38∆ acorta la fase lag. Esto indica efectos específicos de cada RP en la eficiencia de salida de la quiescencia. Entre los parálogos Rps7A/B, Rps7B es el más expresado en fase estacionaria y tras el estímulo nutricional, se asocia a polisomas y difiere del patrón en fase exponencial. rps7A∆ reduce más la traducción global que rps7B∆, sugiriendo funciones distintas.
Los parálogos Rpl16A/B también difieren: ambos se distribuyen de forma similar en polisomas tras la reactivación, pero ensayos de pull-down con Rpl16A-GST indican ribosomas mixtos con ambos parálogos sobre los mismos ARNm, además de polisomas que contendrían solo Rpl16B, cuyo nivel es mayor. rpl16B∆ muestra menor actividad traduccional que rpl16A∆, indicando roles no redundantes.
Por último, Rpl37A se asocia solo a monososomas en quiescencia y su eliminación disminuye la traducción, mientras que eliminar RPL7B no tiene efecto. En los parálogos RP no se distingue si los cambios dependen de la dosis génica o de requisitos específicos. En conjunto, la expresión diferencial y la asociación de las RP sugieren la formación de ribosomas heterogéneos que modulan la traducción durante la salida de la quiescencia.