La adenilil ciclasa 9 de la célula hospedadora regula de manera isoforma-específica la invasión de T. cruzi dependiente de AMPc

Guillermo Di Mario ¹ - Alejandro Pizzoni ² - Daniel Altschuler ² - Martin Edreira ¹

1 Universidad de Buenos Aires;
2 University of Pittsburgh, Pittsburgh, Pennsylvania, USA

Recientemente demostramos que la infección in vitro de Trypanosoma cruzi induce un aumento en los niveles de AMPc en la célula hospedadora, lo que activa la vía Epac-Rap1b y promueve la invasión del parásito. En este trabajo, se realizaron transfecciones transientes en células HeLa con distintas isoformas de adenilil ciclasa (AC), seguidas de la infección con tripomastigotes de la cepa Y (DTU II). Se comprobó que la sobreexpresión de la isoforma 9 de la adenilil ciclasa (AC9) incrementa significativamente el porcentaje de infección respecto del control, mientras que otras isoformas no mostraron efectos detectables. Estas observaciones fueron validadas mediante ensayos de invasión en células con expresión reducida de AC9 por silenciamiento con shARN específico. Adicionalmente, predicciones estructurales obtenidas con AlphaFold sugieren que AC9 podría formar un complejo con Rap1b. A partir de esta información, se realizaron ensayos de invasión en células HeLa que sobre-expresaran mutantes puntuales de AC9 (Y1076A) o de Rap1b (D69A), los cuales impedirían la formación del complejo AC9:Rap1b. En ambos casos, se observó una disminución significativa en la invasión por T. cruzi. En conjunto, estos resultados indican que AC9 regula de manera isoforma-específica la invasión de T. cruzi dependiente de AMPc, y ponen en evidencia la existencia de un posible mecanismo de retroalimentación positiva mediado por Rap1b sobre AC9.