Inducción de biomarcadores de genotoxicidad en células de pulmón A549 expuestas al principio activo del fungicida mancozeb

Chiara Sofia Bonzon - Mariel Paula Poltronieri - Stefan Zylberstein - Nancy Andrioli - Gabriela Chaufan

Laboratorio de Enzimología, Estrés y Metabolismo, Departamento de Química Biológica (IQUIBICEN-CONICET), FCEyN, UBA. 2Grupo de Investigación en Biología Evolutiva, Departamento de Ecología, Genética y Evolución (IEGEBA−CONICET), FCEyN, UBA.

El mancozeb (MZ) es un fungicida de amplio espectro ampliamente utilizado para el control de enfermedades fúngicas en frutas y hortalizas. La evidencia disponible sobre sus efectos genotóxicos en humanos es limitada. En el presente trabajo se muestran los resultados obtenidos al realizar los ensayos de micronúcleos en células binucleadas (MNCB) y electroforesis en gel de células individuales o Ensayo Cometa (EC) sobre la línea celular de adenocarcinoma humano (A549) expuesta por 24 h a un rango subletal del principio activo MZ. El rango subletal se determinó mediante el ensayo MTT, obteniéndose una CL50 de 44,10 µg/mL, a partir de la cual se seleccionaron las concentraciones para el análisis genotóxico. A partir del ensayo MNCB se determinó el Índice de división nuclear (IDN) para las concentraciones 2,5; 5; 7,5; 10; 15 y 20 µg/ml de MZ, obteniendo valores significativamente menores respecto del control en 15 y 20 µg/mL (p = 0,018 y p < 0,001). Para el EC , las células expuestas a 10, 15 y 20 µg/mL presentaron un incremento significativo del daño en ADN a 20 µg/mL (p = 0,017), empleando H2O2 como control positivo. Estos resultados sugieren que la exposición a concentraciones mayores a 10 µg/ml de MZ induce la detención y ralentización del ciclo celular, expresada como disminución del biomarcador IDN de citotoxicidad/citostaticidad, posiblemente como resultado del daño genotóxico. Este daño se manifiesta en concentraciones citotóxicas/citostáticas de 20 µg/ml, con ensayos no dependientes de la división celular como el EC. En conclusión, el principio activo del fungicida MZ mostró efectos genotóxicos en células humanas A549 con una relación concentración-respuesta que sugiere la existencia de un umbral de efecto. Esto indica que la inducción de los biomarcadores podría estar mediada por mecanismos de acción indirectos, posiblemente involucrando moléculas distintas al ADN, y que finalmente se manifiestan en la ruptura de la cromatina.