Mayor captación de micelas poliméricas manosiladas por macrófagos humanos en un modelo in vitro de granuloma de tuberculosis latente

Camila B Martinena ¹ - Facundo Ortellado ^1,3 - Candela Martin ¹ - Ana J Bazan Bouyrie ^1,3 - Rocío Zuazo ¹ - Agustín D Vitti ¹ - Federico Tritscheler ¹ - Nicolás O Amiano ^1,3 - Verónica E García ^1,3 - Marcela Moretton ² - Nancy L Tateosian ^1,3

1 Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales (IQUIBICEN-CONICET), Universidad de Buenos Aires.
2 Instituto de Tecnología Farmacéutica y Biofarmacia (InTecFyB), Facultad de Farmacia y Bioquímica, Universidad de Buenos Aires. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas, CONICET
3 Facultad de Ciencias Exactas y Naturales de la Universidad de Buenos Aires (UBA).

Aproximadamente una cuarta parte de la población mundial alberga infección tuberculosa latente (LTBI). La isoniazida (INH) es el principal fármaco para el tratamiento de LTBI; sin embargo, su uso prolongado puede causar efectos adversos graves. Debido a esto, se necesitan nuevos sistemas de liberación para mejorar la eficacia y la seguridad.
El objetivo de este trabajo es evaluar la captación y la actividad microbicida de micelas poliméricas de Soluplus® cargadas con INH, decoradas con manosa (INH-manPM) o no (INH-PM), en distintas poblaciones de macrófagos dentro de un modelo 3D de granuloma de LTBI. Para ello, se diferenciaron monocitos humanos a macrófagos (M0) y se polarizaron a M1 (IFNγ + Mtb-Ag) o M2 (IL-4 + IL-13). La polarización se confirmó mediante citometría de flujo. Luego, la captación de micelas marcadas con rodamina (Rhod-PM, Rhod-manPM) se evaluó por microscopía confocal. Finalmente, se generó un modelo 3D de granuloma de LTBI infectando PBMCs con Mtb H37Rv (MOI 1:200). La actividad microbicida de INH-PM, INH-0.1%manPM y INH-0.5%manPM se determinó mediante recuento de UFC.
Se observó que tanto los macrófagos M1 como M2 internalizaron Rhod-manPM con mayor eficiencia que Rhod-PM (p<0.05). INH-0.5%manPM redujo el Mtb intracelular en un 34% frente a la INH soluble, a una concentración diez veces menor (0.005 vs. 0.05 μg/ml; p<0.05). Estos resultados indican que las micelas mannosiladas mejoran la captación por macrófagos y la eficacia microbicida, representando una estrategia prometedora de nanotransporte para el tratamiento de LTBI.