Caracterización estructural-funcional de una nueva variante de DUX4 identificada en pacientes pediátricos argentinos con leucemia linfoblástica aguda

Vera Ricchezza - Ignacio Nahuel Gómez Mercado - Eduardo Jelic - Santiago Di Lella - María Sol Ruiz - Diana Wetzler

1 Departamento de Química Biológica, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad de Buenos Aires.
2 Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales (IQUIBICEN), CONICET.

La leucemia linfoblástica aguda (LLA) es el cáncer más común en la población pediátrica. Aunque la supervivencia global ha mejorado significativamente, los tratamientos actuales están asociados con toxicidad aguda y morbilidades a largo plazo, y entre el 15% y el 30% de los pacientes experimentan recaídas. La identificación de biomarcadores y grupos de riesgo permite ajustar la intensidad del tratamiento e integrar terapias dirigidas.
DUX4 es un factor de transcripción cuya expresión está restringida al desarrollo embrionario; su reactivación anómala se ha vinculado a enfermedades como el cáncer y la distrofia muscular facioscapulohumeral. En la LLA, el subtipo molecular DUX4 es causado por fusiones génicas y se define por un perfil transcripcional específico. En un estudio realizado con muestras de pacientes pediátricos argentinos con LLA, identificamos una variante de nucleótido único novel de DUX4 localizada en uno de los homeodominios de unión al ADN
El reemplazo de una isoleucina (Ile65), involucrada en una interacción hidrofóbica con las bases del ADN blanco, por una asparagina podría permitir la formación de enlaces de hidrógeno con las bases y alterar potencialmente la funcionalidad de la proteína. Para abordar esta posibilidad, proponemos un enfoque biofísico y bioquímico in vitro utilizando proteínas recombinantes. Brevemente, partiendo de un plásmido que codifica para el dominio N-terminal de DUX4 salvaje, generamos la versión mutante, optimizamos la expresión en bacterias y la purificación de ambas variantes. A continuación, proponemos realizar una caracterización estructural y funcional comparativa de ambas variantes.