S7 - Symposium 3

Indicios de la comunicación bacterias-hospedador: transporte transcelular de vesículas extracelulares de Lacticaseibacillus casei BL23 a través de un modelo in vitro de epitelio intestinal.

Dominguez Rubio, Ana Paula ^1,2 -D Antoni, Cecilia Luciana ^1,2 - García, María Noé ^3,4 - Grasso, Daniel ^3,4 - Marcilla, Antonio ^5,6 - Piuri, Mariana ^1,2 - Pérez, Oscar Edgardo ^1,2

1) Departamento de Química Biológica, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad de Buenos Aires, Buenos Aires, Argentina.
2) Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad de Buenos Aires, Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas, Buenos Aires, Argentina.
3) Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral (IDEHU), CONICET, Facultad de Farmacia y Bioquímica, Universidad de Buenos Aires, Buenos Aires, Argentina.
4) Departamento de Ciencias Biológicas, Facultad de Farmacia y Bioquímica, Universidad de Buenos Aires, Buenos Aires, Argentina.
5) Àrea de Parasitologia, Departament de Farmàcia i TecnologiaFarmacèutica i Parasitologia, Universitat de València, Burjassot, Valencia, Spain.
6) Joint Research Unit on Endocrinology, Nutrition and Clinical Dietetics, Health Research Institute La Fe, Universitat de Valencia, Valencia, Spain
Contacto: apaudr@gmail.com

Hoy en día, la microbiota intestinal se considera un nuevo "-órgano vital"- y se ha demostrado que el consumo de probióticos tiene efectos beneficiosos a nivel sistémico sobre diferentes órganos extraintestinales. Los mecanismos implicados en los beneficios de los probióticos no están completamente dilucidados y se han asociado, al menos en parte, a sus vesículas extracelulares (EVs).

Con el objetivo de buscar indicios en las formas de interacción mediada por EVs entre la bacteria L. casei BL23 y el hospedador humano, se estudió el transporte de estas EVs a través de células intestinales humanas. Para ello se empleó un modelo in vitro de barrera intestinal que consiste en diferenciar la línea celular Caco-2 a enterocitos durante 14 días. Dichas células se polarizan en cara apical y basal, y forman uniones estrechas constituyendo una monocapa. Las células fueron diferenciadas en un sistema de transwell y se las incubaron con diferentes concentraciones de EVs de L. casei BL23 marcadas con CFSE en el compartimento superior del transwell y se cuantificó el pasaje de las EVs bacterianas al compartimento inferior mediante EV Analyzer y citometría de flujo. Además, se estudió el transporte de las mismas mediante un ensayo in vivo de time-lapse por microscopía confocal. En este caso, se diferenciaron las células intestinales en placas de 35 mm para microscopía y se las incubaron con EVs marcadas con CFSE y luego se tiñó con FM4-64 la membrana plasmática de las células Caco-2. El transporte de las EVs de L. casei BL23 resultó ser dosis dependiente y, este transporte, ocurrió a través del eje Z de las células intestinales.

El transporte de las EVs de L. casei BL23 a través de las células epiteliales intestinales podría ser un primer paso relevante en la interacción con el humano para ejercer sus efectos beneficiosos.