P6 - Parasitología

Estudio preliminar sobre el efecto de variables preanalíticas en la obtención de vesículas extracelulares de parásitos cestodos

García, Lucia C. A. ^1,2 - Gazul Eric R. ^1,2,3 - Muniz-Lagos, Ana Clara ⁴ - Pérez Quignon, Agustina ^1,2,3 - Santana, María Eugenia ^1,2 - Mourglia-Ettlin, Gustavo ⁴ - Cucher, Marcela ^1,2

1) Departamento de Microbiología, Facultad de Medicina, Universidad de Buenos Aires, Buenos Aires, Argentina
2) Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica (IMPAM, UBA-CONICET), Universidad de Buenos Aires, Buenos Aires, Argentina
3) Universidad Argentina de la Empresa (UADE), Instituto de Tecnología (INTEC), Buenos Aires, Argentina
4) Área Inmunología, Departamento de Biociencias (DEPBIO), Facultad de Química, Universidad de la República, Montevideo, Uruguay- Unidad Asociada de Inmunología, Instituto de Química Biológica (IQB), Facultad de Ciencias, Universidad de la República, Montevideo, Uruguay- Laboratorio de Inmunología, Instituto de Higiene 'Prof. Arnoldo Berta', Universidad de la República, Montevideo, Uruguay
Contacto: lucicgarcia.lg@gmail.com

Las zoonosis causadas por parásitos cestodos están asociadas a contextos de pobreza y prácticas de higiene deficientes. Pueden afectar tanto a humanos como mamíferos domésticos y silvestres en todo el mundo. A pesar de su importancia sanitaria, su detección y diagnóstico son aún deficientes, por lo que el estudio de las vesículas extracelulares (VEs) como fuente de biomarcadores ha cobrado gran relevancia en el contexto de estas parasitosis. Previamente, reportamos que Mesocestoides corti, modelo experimental ampliamente utilizado para el estudio de cestodos, secreta VEs in vitro. En este trabajo exploramos el efecto de distintas variables preanalíticas sobre el rendimiento en la obtención de VEs.
Para ello, evaluamos distintas cantidades de parásitos, así como también tiempos de incubación y métodos de purificación. De esta forma, se cultivaron tetratiridios (estadio larval) en medio de cultivo DMEM alto en glucosa, suplementado con antibióticos y libre de suero fetal bovino y se analizaron tanto los medios sin purificar como purificados mediante precipitación con PEG o ultracentrifugación. Mediante análisis de seguimiento de nanopartículas, se obtuvieron los valores de concentración, distribución de tamaños y carga superficial de las VEs presentes en cada muestra.
Este estudio preliminar permitió optimizar las condiciones experimentales para la obtención in vitro de VEs de M. corti, comparar métodos de purificación, estudiar la dinámica de secreción de VEs en este organismo y generar procedimientos extrapolables a otros modelos de estudio. Los avances aquí descriptos consolidan a M. corti como un modelo accesible y reproducible para el estudio de VEs en cestodos, aportando herramientas clave para futuras investigaciones.

Palabras clave: CESTODO, VARIABLES PREANALÍTICAS, PEG, ULTRACENTRIFUGACIÓN, NTA