P30 - Inmunología (ratón)

Estudio comparativo del perfil inmunológico y vesículas extracelulares en ratones WT y knockout para el receptor H4

Formoso, Karina* ¹ - Nicoud, Melisa* ¹ - Monteleone, Melisa ^2,3 - Brocco, Marcela ^2,3 - Moretton, Marcela ^4,5 - Chiappetta, Diego A. ^4,5 - Medina, Vanina ¹

1) Instituto de Investigaciones Biomédicas , CONICET - UCA, Ciudad Autónoma de Buenos Aires, Argentina
2) Instituto de Investigaciones Biotecnológicas (IIB), CONICET-UNSAM, Buenos Aires, Argentina.
3) Escuela de Bio y Nanotecnología (EByN), UNSAM, Buenos Aires, Argentina.
4) Cátedra de Tecnología Farmacéutica I, Facultad de Farmacia y Bioquímica, UBA, Ciudad Autónoma de Buenos Aires, Argentina
5) Instituto de Tecnología Farmacéutica y Biofarmacia (InTecFyB), UBA, Ciudad Autónoma de Buenos Aires, Argentina
Contacto: Kformoso.biomed@gmail.com

La histamina es una amina biogénica con acción fisiopatológica compleja a través de cuatro receptores. El receptor RH4 se expresa principalmente en células del sistema inmunitario y en tejidos como bazo, timo y células tumorales. Ha sido descrito como un regulador clave de la inmunidad y la inflamación en asma, alergias, prurito, enfermedades autoinmunes y cáncer. Los ratones knockout (KO) para RH4 son un modelo in vivo frecuente, aunque existen pocos datos sobre su perfil inmunológico en condiciones fisiológicas.
En este trabajo se evaluó el rol inmunomodulador del RH4 en ratones BALB/c machos wild type (WT) y KO, de 8 (jóvenes) y 30 (adultos) semanas de edad. Se analizaron subpoblaciones inmunitarias en bazo y ganglios (linfocitos T CD4+, CD8+, Tregs CD4+CD25+FoxP3+, linfocitos B CD19+, células NK CD3–CD49+), la quimiotaxis de linfocitos T (ensayo transwell) y la funcionalidad de linfocitos T y B tras activación (ConA, anti-CD3/CD28, LPS).
Los KO jóvenes mostraron aumentos en CD19+ (p = 0.003), Tregs (p = 0.0015) y NK (p = 0.0582), junto con menor reactividad de linfocitos T y B y disminución en la migración de linfocitos T (p = 0.0014). Los KO adultos presentaron mayor número de glóbulos blancos y esplenomegalia (p = 0.0263).
A partir de cultivos esplénicos de ratones WT y KO se aislaron vesículas extracelulares mediante centrifugación diferencial, conservando fracciones tras 20.000 g y 100.000 g. Aunque la purificación debe optimizarse para caracterizar su composición, el análisis por dispersión dinámica de la luz reveló poblaciones heterogéneas con diferencias leves entre centrifugaciones y genotipos.
Estos hallazgos confirman el papel inmunomodulador del RH4 en ausencia de patología y ofrecen una caracterización inicial de vesículas extracelulares en cultivos esplénicos de ratones WT y KO. Futuras investigaciones explorarán su implicancia en inmunosenescencia y la relevancia funcional de estas vesículas.

Palabras clave: Histamina, Receptor H4, inmunomodulación, vesículas extracelulares