P22 - Enfermedades humanas

Vesículas extracelulares anti-inflamatorias para regeneración de córneas

Santa Cruz, Diego M. ¹ - Cantero, M. José ² - Fiore, Esteban Juan ² - Pacienza, Natalia A. ¹

1) Laboratorio de Regulación Génica y Células Madre, Instituto de Medicina Traslacional, Trasplante y Bioingeniería , CONICET - Universidad Favaloro, Ciudad Autónoma de Buenos Aires, Argentina
2) Laboratorio de Hematología Experiemntal y Terapia Génica. Instituto de Investigaciones en Medicina Traslacional, CONICET, Universidad Austral, Pilar, Bs. As., Argentina
Contacto: dsantacruz4@gmail.com

Introducción
Cuando se daña la córnea, esta puede volverse opaca, causando pérdida de visión. La cicatrización y reparación tisular efectiva es el producto de la correcta concertación de los diferentes eventos moleculares y fenotípicos, que en tejidos adultos, suelen culminar en la formación de una cicatriz. Debido a que los procesos que conllevan a la opacidad corneal se deben básicamente a una desregulación de mecanismos regenerativos e inflamatorios, nos propusimos evaluar el potencial terapéutico de vesículas extracelulares (EVs) derivadas de células madre mesenquimales estromales (MSCs) en un modelo experimental de injuria corneal.
Métodos
Previamente, desarrollamos un sistema de aislamiento de vesículas extracelulares y posterior análisis de su potencial anti-inflamatorio (in vitro). La producción y aislamiento de EVs abarca el cultivo controlado de MSCs y purificación de EVs del medio condicionado mediante cromatografía de intercambio iónico. En este estudio, establecimos un modelo murino de regeneración corneal mediante aplicación tópica de 10µl de NaOH (0,125 M) y posterior tratamiento con igual volumen de EVs (1x10^9 partículas/ml) por 5 días consecutivos. La acción terapéutica de las EVs se evaluó mediante tinción tisular (hematoxilina-eosina) y determinación de los niveles de expresión de citoquinas inflamatorias por real-time RT-PCR.
Resultados
En la observación clínica y tisular se observa que el NaOH indujo injuria moderada del tejido corneal con un claro restablecimiento del tejido luego del tratamiento con vesículas (vs vehículo). Respecto a las citoquinas evaluadas, estas aumentaron significativamente su expresión luego de la injuria química- revirtiendo tras el tratamiento con EVs (n=5, p<0.05).
Conclusión
De los resultados obtenidos, se desprende, que logramos establecer un modelo sencillo de injuria del epitelio corneal en el cual testear diversas estrategias terapéuticas y, a su vez, demostramos el enorme potencial regenerativo de las EVs en patologías oculares de orden inflamatorio.

Palabras clave: Células madre mesenquimales estromales, Vesículas extracelulares, Regeneración