ALTERACIONES INDUCIDAS POR HEXACLOROBENCENO (HCB) EN LA ACTIVIDAD DEL CITOCROMO P450 SOBRE ÁCIDO ARAQUIDÓNICO Y UROPORFIRINÓGENO III

Fuentes Federico, Billi Silvia, San Martín de Viale Leonor. Química Biológica, FCEyN, UBA. email: fedfue@hotmail.com

Se realizó un estudio en el efecto del HCB sobre la inducción de isoenzimas del citocromo P450 (P450) en el metabolismo dependiente del P450 de dos sustratos endógenos: uropofirinógeno (UROgen) y ácido araquidónico (AA). Con este objetivo evaluamos: 1) la actividad de P450 1A1, 1A2 y 2B; 2) la velocidad de oxidación de UROgen y la formación de inhibidor de UROgen decarboxilasa, y 3) la metabolización de AA, luego de la administración de HCB a ratas Wistar (5 dosis de 100 mg/kg peso corporal) en función del tiempo (1, 2, 3 y 8 semanas) luego de la primera dosis. Las isoenzimas de P450 1A1, 1A2 y 2B se midieron utilizando etoxiresorufina, metoxiresorufina y aminopirina como sustratos. Estas actividades aumentaron en todo momento luego del tratamiento con HCB. P450 1A1 alcanzó su pico en la segunda semana (6 veces (valores normales: 43-70 pmol/min/mg prot)) mientras que 1A2 y 2B lo hicieron en la primer semana (17 veces (valores normales: 39-60 pmol/min/mg prot) y 8 veces (valores normales: 1,7-2,1 nmol/min/mg prot) respectivamente). La velocidad de oxidación de UROgen aumentó en todos los tiempos ensayados (185-300 vs 58-66 pmoles/min/mg prot). La metabolización de AA dependiente de P450 se evaluó utilizando [3H]AA y TLC. Las ratas tratadas mostraron alteraciones respecto a las actividades control (0,75-1 nmol/min/mg prot) y no se detectó ninguna actividad luego de la octava semana. Los wsOH-AA aumentaron en las semanas 1-3 y declinaron en la 8, mientras que los epoxi-AA siempre disminuyeron. En conclusión, la inducción de P450 1A1, 1A2 y 2B por una droga foránea (HCB) producen alteraciones en las actividades dependientes de P450 sobre sustratos endógenos pertenecientes a distintos metabolismos. Llevando a una disminución de un intermediario del camino del hemo y a una disminución de lípidos bioactivos producidos por el metabolismo de AA dependiente de P450.

HEXACHLOROBENZENE (HCB) INDUCED ALTERATIONS OF CYTOCHROME P450 ACTIVITIES ON ARACHIDONIC ACID AND UROPORPHYRINOGEN III

Fuentes Federico, Billi Silvia, San Martín de Viale Leonor. Química Biológica, FCEyN, UBA. email: fedfue@hotmail.com

A study was made on the effect of HCB induction of isoenzymes of cytochrome P450 (P450) on the P450 dependent metabolism of two endogenous substrates: uroporphyrinogen (UROgen) and arachidonic acid (AA). With this purpose we evaluated: 1) the activity of P450 1A1, 1A2 and 2B, 2) UROgen oxidation rate and UROgen decarboxylase inhibitor formation, 3) AA metabolization after HCB administration to Wistar rats (5 doses of 100 mg/kg bw) as a function of time (1,2,3 and 8 weeks (w)) after the 1st dose. P450 1A1, 1A2 and 2B isoenzymes were measured using ethoxyresorufin, metoxyresorufin and aminopyrine as substrates. These activities always increased after HCB treatment. P450 1A1 peaked on the 2nd w (6 fold) (nv:43-70 pmol/min/mg prot) while the 1A2 and 2B isoforms did so on the 1st w (17 fold (nv:39-60 pmol/min/mg prot) and 8 fold (nv:1.7-2.1 nmol/min/mg prot) respectively). The rate of UROgen oxidation increased at all assayed times (185-300 vs 58-66 pmoles/min/mg prot). The P450-dependent AA metabolization was evaluated using [3H]AA and TLC. Treated rats showed alterations respect to control activities (0.75-1 nmol/min/mg prot) and no activity was detected after 8 w. wsOH-AA increased on 1-3 w and declined on 8 w, while epoxy-AA always diminished. Thus, P450 1A1, 1A2 and 2B-induction by a foreing drug (HCB) produced alterations of P450 activities on endogenous substrates belonging to different metabolisms. So leading to the decrease of both an intermediary of heme pathway and the bioactive lipids produced from P450 dependent AA metabolism.